饰纹汀蛙虹彩病毒 PCR 检测试剂盒

虹彩病毒科(Iridoviridae)下分 5 个属, 即蛙病毒属(Ranavirus)、淋巴囊肿
病毒属(Lymphocystivirus)、细胞肿大病毒属(Megeaocytoviurs)、虹彩病毒属
(Iridovirus)和绿虹彩病毒属(Chloriridovirus)。其中后 2 个病毒属感染昆虫, 而
前 3 个病毒属的虹彩病毒感染多种水生经济动物并呈全球性分布。
蛙病毒属是虹彩病毒科中成员最多的一属，为裸露或有囊膜的二十面体病毒
粒子，基因组为单分子、线状双链 DNA，病毒直径约 150-170 nm，DNA 全
长为 150-170 kb。其中大部分病毒都会引起水生动物疾病, 包括流行性造血器
官坏死病毒(epizootic haematopoietic necrosis virus, EHNV)、斑点叉尾鮰
虹彩病毒(catfishiridovirus)、黑真鮰蛙病毒(ictalurus melas ranavirus)和虹
鳟蛙病毒 (oncorhynchus mykiss virus) 、 欧 鲶 病 毒 (european sheetfishiridovirus,
ESV)、欧洲鮰鱼病毒(european catfish virus，ECV)、饰纹
汀蛙虹彩病毒(bohle iridovirus，BIV)、虎纹蛙病毒(tiger frog virus，TFV)等
数十种病毒。蛙病毒属病毒感染宿主范围广泛，涉及鱼类、两栖类、爬行类近百
种水生动物, 而且发病率和死亡率都很高。
鉴于蛙虹彩病毒对水产养殖业的严重危害, 有必要建立一种准确、快速、灵
敏的检测方法对其进行监控, 保证水产养殖业的健康发展。本产品即是基于 PCR
方法对饰纹汀蛙虹彩病毒 BIV 的快速检测试剂盒。它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 625 bp。
3. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

运输及保存:

使用方法:

一、样品 DNA 的制备
用自选方法纯化待测样品的 DNA。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体菌做阳性对
照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。
最好在专门的区域操作。
三、设置 PCR 反应（25 uL 体系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 样品 阳性对照 阴性对照
BIV 专一性引物对 2 uL 2 uL 2 uL
样品 DNA 1-5 uL 无 无
BIV 阳性对照 无 2 uL 无
补超纯水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行 PCR。
过程 温度 时间
预变性 94℃ 5 min
PCR 反应
（30 个循环）
94℃ 15 s
57℃ 30 s
72℃ 1 min
延伸 72℃ 2 min
5. 电泳检测 PCR 产物。预期的 PCR 产物长度为 625 bp