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大鼠直肠组织提取物操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。 

1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线。

羊抗人IgA (抗血清) Anti-Human IgA antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗人IgA (抗血清) Anti-Human IgA antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
兔抗人IgG~Fc (抗血清) Anti-Human IgG (Fc spec.) produced in ... 1ML 免疫血清
羊抗人IgG (抗血清) Anti-Human IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗人IgG (抗血清) Anti-Human IgG antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
羊抗人IgM血清 (μ链特异) Anti-Human IgM (μ-chain spec.) produc... 1ML 免疫血清
羊抗人IgM (抗血清) Anti-Human IgM antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗人IgM (抗血清) Anti-Human IgM antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
羊抗人血清 (多价抗体) Anti-Human Serum antibody produced in ... 1ML 免疫血清
兔抗人血清 (多价抗体) Anti-Human Serum antibody produced in ... 1ML 免疫血清
兔抗猴IgG (抗血清) Anti-Monkey IgG antibody produced in r... 1ML 免疫血清
兔抗小鼠IgG~Fc (抗血清) Anti-Mouse IgG (Fc spec.) produced in ... 1ML 免疫血清
羊抗小鼠IgG (抗血清) Anti-Mouse IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗小鼠IgG (抗血清) Anti-Mouse IgG antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
兔抗小鼠血清 (多价抗体) Anti-Mouse Serum antibody produced in ... 1ML 免疫血清
兔抗HRP (抗血清) Anti-Peroxidase antibody produced in r... 1ML 免疫血清
羊抗猪IgG (抗血清) Anti-Pig IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清
羊抗兔IgG (抗血清) Anti-Rabbit IgG antibody produced in g... 1ML 免疫血清
羊抗大鼠IgG (抗血清) Anti-Rat IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗大鼠IgG (抗血清) Anti-Rat IgG antibody produced in rabbit 1ML 免疫血清
兔抗绵羊IgG (抗血清) Anti-Sheep IgG antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
图标 FITC荧光标记抗体;免疫组化/免疫荧光/流式荧光:1:20;抗体含量:10mg/ml;-20 ℃ 保存
中文名(CN) 英文名(EN) 规格(SP) 类别(Key)


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