猪瘟病毒 RT-PCR 检测试剂盒

猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV；或称 Hog cholera virus，

HCV）是 ssRNA 病毒，属黄病毒科瘟病毒属，其 RNA 为单股正链。由 CSFV

引起的猪瘟病是一种急性、热性、高度接触性的传染病，广泛存在于全世界各养

猪国家，严重危害养猪业的发展。因此，CSFV 的快速准确鉴定，对该病的预防

和检疫有着重要作用。为此本公司开发了本产品，采用 RT-PCR 技术检测疑似

感染动物血清或组织中的 CSFV。它具有下列特点：

1. 用于 CSFV 的定性鉴定检测和分子流行病学调查。

2. 能对样品中 CSFV 进行快速检测，具有良好的特异性和敏感性。

3. 使用一管式 RT-PCR 试剂盒，减少了操作步骤，降低了操作误差。

运输及保存:

使用方法:

 一、样品 RNA 的制备

用自选方法纯化 CSFV 样品的 RNA，也可以另购本公司的一管式病毒

RANout 或柱式病毒 RNAout，上述两款产品跟本试剂盒兼容。

二、阳性对照

1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对

照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

2. 使用本阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。

最好在专门的区域操作。

三、设置 RT-PCR 反应（30 uL 体系）

3. 在 PCR 管中加入下列成分：

成 份 样品 阳性对照 阴性对照

双酶一管式 RT-PCR Buffer，2× 15 uL 15 uL 15 uL

CSFV 专一性引物对 2 uL 2 uL 2 uL

样品 RNA 1-5 uL 无 无

CSFV 阳性对照 无 2 uL 无

补超纯水到 28 uL 28 uL 28 uL

MMLV-Taq Mix 2 uL 2 uL 2 uL

4. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行 RT-PCR。

过程 温度 时间

逆转录 60℃ 30 分钟

预变性 94℃ 2 分钟

PCR 反应

（30 个循环）

94℃ 30 s

55℃ 30 s

72℃ 1 分钟

延伸 72℃ 5 分钟

5. 电泳检测 RT-PCR 产物。预期的 PCR 产物长度为 267 bp。