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即用型PCR试剂盒
布鲁氏菌病(brucellosis)又称地中海弛张热,马耳他热,波浪热或波
状热,是由布鲁氏菌(Brucellae)引起的人畜共患性全身传染病。布鲁氏菌为革
兰氏阴性短小杆菌,初次分离时多呈球状,球杆状和卵圆形,故名。根据宿主
的不同,布鲁氏菌分为 10 个种。目前已知有 60 多种家畜、家禽,野生动物
是布鲁氏菌的宿主。与人类有关的传染源主要是牛布鲁氏菌(Brucella
abortus)、羊布鲁氏菌(Brucella melitensis)及猪布鲁氏菌(Brucella
suis)。临床上以羊、牛、猪三种意义最大,羊种致病力最强。因此基于 PCR
的快速检测羊、牛、猪种布鲁氏菌病具有重要的应用价值。本产品就是专门用
于检测羊、牛、猪种布鲁氏菌病的 PCR 试剂盒,它具有下列特点:
1. BA、BM 和 BS 分别用于定性检测牛、羊、猪布鲁氏菌病,灵敏度远高于
ELISA 检测法。
2. 专一性强,能分别检测到各菌的几乎所有亚型。
3. 引物根据全基因序列设计,特异性高。
4. 使用即用型 PCR 试剂盒,减少了操作步骤,降低了操作误差。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法纯化待测样品的 DNA,也可以另购本公司的细菌 DNAout 或
柱式细菌 DNAout,上述两款产品跟本试剂盒兼容。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体细菌做阳性
对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成
分。最好在专门的区域操作。
三、设置 PCR 反应(60 uL 体系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 样品 阳性对照 阴性对照
牛、羊、猪布鲁氏菌专一性引物对
(三种之一) 2 uL 2 uL 2 uL
样品 DNA 1-5 uL 无 无
牛、羊、猪布鲁氏菌阳性对照
(三种之一) 无 2 uL 无
补超纯水到 30 uL 30 uL 30uL
即用型 PCR Mix 3.0 30 uL 30 uL 30 uL
4. 轻柔混匀后上机,按下面参数进行 PCR。
过程 温度 时间
预变性 95℃ 5 min
PCR 反应
(40 个循环)
95℃ 1 min
55℃ 1 min
72℃ 3 min
延伸 72℃ 10 min
5. 电泳检测 PCR 产物。BA 预期的 PCR 产物长度为 783 bp;BM 预期的
PCR 产物长度为 162 bp;BS 预期的 PCR 产物长度为 393 bp。
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