非洲猪瘟病毒PCR检测试剂盒

非洲猪瘟(Af rican swine fever , ASF) 是由非洲猪瘟病毒(Af rican swine fever
virus , ASFV) 引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病，病死率高达 100 %,是
我国一类动物疫病和世界动物卫生组织规定的必须报告的动物疫病，受到世界各国的高
度重视。因此 ASFV 的快速准确鉴定，对该病的预防和检疫有着重要作用。目前，对于
中国这种非 ASF 疫区，ASF 的检测主要以丌涉及活病毒传代操作的 PCR 为主，为此本
公司开发了 ASFV 的 PCR 检测试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物经过优化，灵敏性比使用世界动物卫生组织推荐的引物高 100 倍以上。
3. 特异性高，引物是根据保守的 vp73 基因设计，OIE（世界动物卫生组织）推荐。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

运输及保存:

使用方法:

一、样品 DNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 DNA。注意：可以选用本公司的一管式病毒 DNAout 戒柱
式病毒 DNAout 产品。
二、PCR（60 uL 体系）
1、样品管：在 PCR 管中加入下列成分：
成分 加入量
PCR MagicMix 2.0 30 uL
待检测样品 DNA(自备) X
ASFV 专一性引物一 2 uL
ASFV 专一性引物二 2 uL
补水到 60 uL
三、PCR 反应参数：
过程 温度 时间
预变性 94℃ 5 min
PCR 反应
（35 个循环）
94℃ 1 min
50℃ 1 min
72℃ 1 min
最后延伸 72℃ 10 min
四、电泳检测
1、取 10-20 uL PCR 产物直接在 PAGE 戒琼脂糖凝胶上电泳，最好使用 100 bp DNA
Marker，产物的大小为 278 bp。