猪痢疾短螺旋体 PCR 检测试剂盒

猪痢疾（SD）的病原体是一种革兰氏阴性的厌氧性螺旋体，先后命名为猪痢
疾密螺旋体、猪痢疾蛇形螺旋体，现在统一命名为猪痢疾短螺旋体（Brachyspira
hyodysenteriae；B．h）。由猪痢疾短螺旋体引起的猪痢疾是一种肠道传染病，
以黏液性或黏液出血性腹泻为特征，也被称之为弧菌性痢疾、血痢、黑痢等。该病
在猪群中的发病率相当高，病猪生长发育受阻，耗料增加，给各地养猪业造成很大
的经济损失。本产品从动物检疫的实际出发，建立了 PCR 检测方法，用于猪痢疾
短螺旋体的快速检测。它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 根据猪痢疾短螺旋体 Nox 基因设计引物，引物经过优化，特异性强。预期的
PCR 产物长度为 149 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。

运输及保存:

使用方法:

一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取猪痢疾短螺旋体 DNA。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体菌做阳性对照，
只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。
最好在专门的区域操作。
三、设置 PCR 反应（25 uL 体系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 样品 阳性对照 阴性对照
B．h 专一性引物一 2 uL 2 uL 2 uL
样品 DNA 1-5 uL 无 无
B．h 阳性对照 无 2 uL 无
补超纯水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行 PCR。
过程 温度 时间
预变性 94℃ 5 min
PCR 反应
（30 个循环）
94℃ 40 s
55℃ 30 s
72℃ 30 s
延伸 72℃ 1 min
5. 电泳检测 PCR 产物。预期的 PCR 产物长度为 149 bp。