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即用型PCR试剂盒
猪链球菌病(Streptococcus suis)是一种人畜共患的急性、热性传染病,急性
型常为出血性败血症和脑膜炎,慢性型以关节炎、心内膜炎、化脓性淋巴结炎为特征。
猪链球菌呈圆形或卵圆形,常呈链状排列,长短不一,是革兰氏阳性球菌。在血平板
培养基上生长,菌落周围形成溶血环。现已发现其荚膜抗原血清型有 35 种以上。但
是,并非所有的血清型都有致病性。大多数致病性血清型在 1-9 血清型。血清型 2 为
最常见和毒力最强的血清型。本产品从动物检疫的实际出发,建立了 PCR 检测方法,
用于猪链球菌的快速检测。它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取猪链球菌 DNA。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体菌做阳性对照,只
提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。最
好在专门的区域操作。
三、设置 PCR 反应(25 uL 体系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 样品 阳性对照 阴性对照
S.s 专一性引物一 2 uL 2 uL 2 uL
样品 DNA 1-5 uL 无 无
S.s 阳性对照 无 2 uL 无
补超纯水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 轻柔混匀后上机,按下面参数进行 PCR。
过程 温度 时间
预变性 95℃ 3 min
PCR 反应
(30 个循环)
95℃ 30 s
50℃ 30 s
72℃ 40 s
延伸 72℃ 10 min
5. 电泳检测 PCR 产物。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。