棉蓝乳酚油染色液使用方法

棉蓝乳酚油染色液使用方法：
下面的提作步張为1.5mL料离心管中进行的量提取。如果样品用量垢加,需要使用大的离心管,提取试
剂的用量也需要按比例加。
1.65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,然后取0.5mL加入到1.5mL料心管中并放置65℃待
用。最好使用據盖离心
2.取0.1-0.39的新鮮或令冻的动物美便,加入到预热溶液A的高心管中,震器上周震高5-10分钟。注意
一定要让管底的品充分震起来。
3.将离心管置于65水浴中保温至少5分钟
4.13000-15000室温高心3分钟,将上清转移到一新的1.5mL料高心管中
5.在上清液中加入等体积的溶液日,上下郎30秒使之充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6.将离心管冰浴至少5分钟
7.13000-15000g室温高心3分钟,转移上清到新的1.5mL料离心管中
8.加加入0.2mL的方(自),震蒸器上充分振荡30秒混匀:注意一定要让管底的溶液震荡起来
9.13000-15000室温离心3分钟,小心转移上到新的1.5mL料离心管中
10.重写第8步和等9步一次。
11.将上清转移到新的1.5mL离心管时,不要超过0.5mL,否则没有空间加两倍体积的乙醇。如果有多余的可以
弃之不用
加ロ入2倍体积的乙醇自音),上下頭倒30秒混匀,150009离心5-10分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀
注意:最好不要用异内醇代替乙醇,否则不容易去除市色素的杂质
13.加入1mL75%乙醇自备),震高数秒,13000150009호温离心3分钟,弃上清
14.重复上步清洗一次。注意:75%乙醇洗两次有助于去除PCR抑制物。
15.短哲离心,吸弃残留的75%乙醇(约50uL),室温球干。注意:一定要去除残留的75%乙醇,否则会影后续
反应和电泳上样(样品会飘走
16.加加入30uTE)中液溶解沉淀。注意:不知運样品DNA产本前最好不要加过多TE。如果DNA浓度高,可以再
17.DNA即可用于电泳、酶切和PCR等反应。最好用原液和释液对照做PCR,最好按PCR终体积的1/10加
入随的PCR抑制物清除剂BTN60804)。