细胞增殖检测试剂盒检测原理

细胞增殖检测试剂盒的核心原理在于通过定量分析细胞代谢活性或DNA合成情况，间接反映细胞增殖状态。目前主流技术路线可分为代谢活性检测法和DNA标记法两大类。

代谢活性检测法主要基于活细胞线粒体脱氢酶的作用机制。以CCK-8试剂盒为例，其水溶性四唑盐WST-8在电子载体1-Methoxy PMS存在下，被细胞内脱氢酶还原生成橙黄色甲臜产物。该反应具有两个关键特性：首先，甲臜生成量与活细胞数量呈正相关；其次，产物在450nm处具有特征吸收峰，可通过酶标仪进行精确定量。值得注意的是，该方法检测的是细胞群体的整体代谢活性，因此需注意避免高浓度血清或还原性物质的干扰。

新兴的实时检测技术则采用特殊荧光底物，如resazurin系列染料。这类氧化还原指示剂在还原态时会发出强烈荧光，且具有可逆反应特性，允许对同一批细胞进行持续多时间点监测，特别适用于动态研究药物对细胞增殖的时效关系。实验数据显示，这种方法的检测灵敏度较传统MTT法提高约40%，且毒性更低。

在DNA标记法领域，EdU检测技术因其操作简便性正逐步取代传统的BrdU法。EdU的炔烃基团能与荧光标记的叠氮化物通过点击化学反应高效结合，省去了BrdU检测所需的DNA变性步骤。最新改良方案采用流式细胞术结合EdU/Hoechst双染色，可同步分析细胞周期分布与增殖比例，为肿瘤药敏试验提供更全面的数据支持。
‌