技术文献
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实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
亚碲酸钾(庆大霉素琼脂冻干配套试剂)
亚碲酸钾(四号琼脂冻干配套试剂)
改良纤维二糖多粘菌素B多粘菌素E(mCPC)琼脂基础
3%氯化钠三糖铁琼脂
Cary-Blair氏运送培养基(不含琼脂)
Cary-Blair氏运送培养基
氯化钠多粘菌素B肉汤基础
60g/L氯化钠蛋白胨水(PW)
庆大霉素琼脂
3%氯化钠溶液
我妻氏血琼脂
3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂
碱性琼脂
四号琼脂
TCBS琼脂
缓冲-甘油氯化钠溶液
3%氯化钠碱性蛋白胨水
碱性蛋白胨水
SCDLP液体培养基
营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)
含铁牛奶培养基
亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)
液体硫乙醇酸盐培养基(FT)
胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础(TSC)
卵黄琼脂培养基基础
庖肉培养基基础
缓冲-甘油氯化钠溶液
哥伦比亚琼脂培养基
Pfizer选择性肠球菌琼脂培养基
胆汁液态培养基
脑—心浸萃琼脂培养基
脑—心浸萃液态培养基