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技术文献

血清铁浓度测试盒操作步骤

文字:[大][中][小] 2022-1-18    浏览次数:268    

血清铁浓度测试盒操作步骤(仅供参考):  

1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。

2.准备样品:  

a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。  

b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。  

c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。

   

d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  

e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。

f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  

3、CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。

4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。

Annexin IV 膜粘连蛋白 A4抗体

APG8A 自噬相关蛋白8A抗体

phospho-Akt (Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗体

phospho-AMPK alpha-1 (Thr198) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体

phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗体

APOBEC3G 脱氧胞苷脱氨酶蛋白抗体

AKAP13 蛋白激酶锚定蛋白13抗体

AP1M2 AP-1μ2抗体

Allergin-1 肥大细胞膜抑制性受体Allergin1抗体

ACCN1 脑钠通道蛋白1抗体

ARP2/3 subunit 1B 肌动蛋白相关蛋白2/3复合亚单位B1抗体

ABCG2 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体

alpha 1 Fetoprotein 甲胎蛋白抗体

ATM 毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体

ABCF2 ATP结合盒转运蛋白2抗体

ABLIM3 肌动蛋白结合蛋白LIM蛋白3抗体

Acidic Calponin 酸性钙调蛋白3抗体

phospho-ADAM17 (Thr735) 磷酸化CD156b抗体

ADH5 乙醇脱氢酶5抗体

ADH6 乙醇脱氢酶6抗体

AGPAT5 溶血磷脂酰基转移酶5抗体

AIPL1 遗传性失明相关蛋白AIPL1抗体


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