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技术文献

本迪布焦型埃博拉病毒PCR检测试剂盒反应五要素

文字:[大][中][小] 2022-10-25    浏览次数:207    
本迪布焦型埃博拉病毒PCR检测试剂盒反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒
小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒
小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒
相扑结合酶UBC9(UBE2I/UBC9/UBCE9)ELISA试剂盒
腺相关病毒(AAV)ELISA试剂盒
腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒
腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA试剂盒
腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA试剂盒
腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒
腺苷三磷酸结合盒转运蛋白G2(ABCG2)ELISA试剂盒
线粒体肽蛋氨酸亚砜还原酶(MSRA)ELISA试剂盒
衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒
酰基化饥饿素(AG)ELISA试剂盒
酰化刺激蛋白(ASP)ELISA试剂盒
纤维母细胞生长因子受体1癌基因伴侣(FGFR1OP)ELISA试剂盒



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