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胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)测试盒操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。000~2000g 离心 min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。000~2000g 离心 min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
空肠弯曲杆菌
嗜酸乳杆菌
干酪乳杆菌
耐盐芽孢杆菌
无乳链球菌
德氏乳杆菌乳酸亚种(莱氏曼氏乳杆菌)
斯氏李斯特氏菌
侧孢短芽孢杆菌
乳酸乳球菌乳亚种
牙龈卟啉单胞菌
菩提奇异球菌
干燥棒杆菌
屎肠球菌(屎链球菌)
具核梭杆菌多形亚种
脆弱拟杆菌
齿双歧杆菌
粘性放线菌
植物乳杆菌植物亚种
迟缓爱德华氏菌
哈氏弧菌
Hydrotalea flava
萎缩芽孢杆菌
血链球菌
醋酸醋杆菌
伊氏李斯特氏菌
英诺克李斯特氏菌
红曲霉
不动杆菌
食酸菌
短波单胞菌
多头霉
掘氏疫霉