榛果源性核酸检测试剂盒 PCR-荧光探针法反应五要素
2022-8-15
榛果源性核酸检测试剂盒 PCR-荧光探针法反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
磷酸化雄激素受体抗体 phospho-Androgen Receptor (Ser791)
磷酸化雄激素受体抗体 phospho-Androgen Receptor (Ser94)
磷酸化雄激素受体抗体 phospho-Androgen Receptor (Tyr363)
锚定蛋白重复结构域蛋白激酶ANKK1抗体 ANKK1
磷酸化内收蛋白抗体 phospho-alpha Adducin (Thr445)
膜粘连蛋白11抗体 Annexin A11
膜粘连蛋白13抗体 Annexin A13
磷酸化促肾上腺皮质激素ACTH抗体 phospho-ACTH (Ser168)
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体 phospho-AKT1 (Ser246)
磷酸化蛋白激酶B抗体 phospho-AKT1/3 (Tyr473)
磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体 phospho-alpha 1 Sodium Potassium ATPase (Tyr260)
磷酸化内收蛋白a1抗体 phospho-alpha Adducin(Ser436)
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 phospho-AMPK alpha 1 (Ser487)
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 phospho-AMPK alpha 2 (Ser345)
酸性神经酰胺酶1抗体 ASAH1
粘附调节分子1抗体 ADRM1
气味结合蛋白抗体 Aphrodisin
乙醛脱氢酶2抗体 ALDH2
膜粘连蛋白10抗体 Annexin A10
前梯度同源蛋白2抗体 Anterior Gradient 2
磷酸化雄激素受体抗体 phospho-Androgen Receptor (Ser94)
磷酸化雄激素受体抗体 phospho-Androgen Receptor (Tyr363)
锚定蛋白重复结构域蛋白激酶ANKK1抗体 ANKK1
磷酸化内收蛋白抗体 phospho-alpha Adducin (Thr445)
膜粘连蛋白11抗体 Annexin A11
膜粘连蛋白13抗体 Annexin A13
磷酸化促肾上腺皮质激素ACTH抗体 phospho-ACTH (Ser168)
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体 phospho-AKT1 (Ser246)
磷酸化蛋白激酶B抗体 phospho-AKT1/3 (Tyr473)
磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体 phospho-alpha 1 Sodium Potassium ATPase (Tyr260)
磷酸化内收蛋白a1抗体 phospho-alpha Adducin(Ser436)
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 phospho-AMPK alpha 1 (Ser487)
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 phospho-AMPK alpha 2 (Ser345)
酸性神经酰胺酶1抗体 ASAH1
粘附调节分子1抗体 ADRM1
气味结合蛋白抗体 Aphrodisin
乙醛脱氢酶2抗体 ALDH2
膜粘连蛋白10抗体 Annexin A10
前梯度同源蛋白2抗体 Anterior Gradient 2
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