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硝酸纤维素膜注意事项

2022-8-19

硝酸纤维素膜注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。

6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。

人半胱天冬酶3(CASP3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CASP3 (Caspase 3) ELISA Kit
人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CTSB (Cathepsin B) ELISA Kit
人组织蛋白酶V(CTSV)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CTSV (Cathepsin V) ELISA Kit
人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit
人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 
人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 
人调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed and Secreted) ELISA Kit 
人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit
人嗜酸粒细胞趋化因子(ECF/CCL11)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit
人胸腺激活调节趋化因子(TARC)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TARC (Thymus Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit
人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MIP-3α (Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit 
人二级淋巴组织趋化因子(SLC)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human SLC (Secondary Lymphoid Tissue Chemokine) ELISA Kit
人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MDC (Macrophage Derived Chemokine) ELISA Kit
人髓样前体细胞抑制因子2(MPIF2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit
人巨噬细胞炎性蛋白4α(MIP4α)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MIP4α (Macrophage Inflammatory Protein 4 Alpha) ELISA Kit
人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CTACK (Cutaneous T-cell Attracting Chemokine) ELISA Kit
人可溶性CD14分子(sCD14)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human sCD14 (Soluble Cluster of Differentiation14) ELISA Kit
人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human FcεRII/CD23 (Receptor II for the Fc Region of Immunoglobulin E) ELISA Kit


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