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人细胞系
产品概述:

293 [HEK-293]细胞是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞,293 [HEK-293]细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出,293 [HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293 [HEK-293]细胞19号染色体(19q13.2)。293 [HEK-293]细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主,可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。
产品信息:
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产品名称 |
293 [HEK-293](人胚肾细胞) |
货号 |
YS-01X6321 |
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英文名称 |
293 [HEK-293] |
细胞形态 |
贴壁细胞 |
| f规格 |
1×10⁶ |
生长特性 |
上皮细胞样 |
别称 Hek293;HEK-293;HEK 293;HEK:293;293;293 HEK;Human Embryonic Kidney 293
RRID CVCL_0045种属 人
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件 冻存液: 无血清非程序冻存液[PB180438]
温度:液氮
培养方案A(默认) 生长培养基:DMEM [PM150210]+10% FBS [164210]+1% P/S [PB180120]
培养条件:气相:空气,95%;CO₂,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:4-1:8
推荐换液频率 2-3次/周
培养步骤:

1)培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液;
2)无菌PBS或无菌生理盐水洗涤3次(按培养体积加入);
3)加入适量胰酶消化适当时间(一般胰酶为0.25%;9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶,一次加入1mL胰酶。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑,一般如果是细胞株,非原代培养,消化1-2分钟足矣);
4)用枪头吹打数十次(视细胞类型而定。一般细胞株30-50次吧,耗时一般2分钟左右);
5)加入适量体积完全培养基终止胰酶消化(如果是9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶,可以加入1mL完全培养基;现在培养瓶(皿)里有2mL溶液)。
6)现在可以将溶液进行分瓶(2mL)。如果是细胞株,直接均分到两个培养瓶(皿)里。如果是原代培养,可以根据消化时间来对细胞进行分离;因此可以将溶液(2mL)都转入新的培养瓶(皿)。
7)将两个培养瓶(皿)补足完全培养基到正常体积(果是9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶,为5mL完全培养液)
8)镜下观察。刚刚传代细胞还没贴壁,悬浮在溶液中,呈圆形。一般2h之内会贴壁,如果已经贴壁,根据细胞类型有不同的形态,但通常都不是圆形。
9)镜下观察无误之后,再放入细胞培养箱。培养瓶(皿)放入之前,可以用消毒酒精先擦一下。
10)传代之后,*第二天细胞换液一次。当然,也可以视情况而定。
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