差异脲原体PCR检测试剂盒使用方法

差异脲原体PCR检测试剂盒使用方法:

　　注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。

　　1. 样本处理(样本处理区)

　　待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书。阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。

　　2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)

　　取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

　　组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

　　1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。

　　2.加样(样本处理区)

　　3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。

　　样本采集、存放及运输:

　　1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集。

　　2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次)。

　　3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。