小鼠血清总补体(CH50)Elisa测定试剂盒原理

      小鼠血清总补体(CH50)Elisa测定试剂盒，作为生物医学研究中的重要工具，其精确性和便捷性对于科研人员来说至关重要。该试剂盒通过酶联免疫吸附试验（Elisa）原理，能够高效地测定小鼠血清中总补体的活性水平，为疾病模型的建立、药物疗效评估以及免疫机制的研究提供了有力的支持。

     在实验中，科研人员首先需要将小鼠血清样本按照说明书要求进行预处理，然后加入到预先包被有特异性抗体的微孔板中。经过一系列温育、洗涤、加酶标抗体、再温育、显色及终止反应等步骤后，通过酶标仪测定各孔的吸光度值。根据标准曲线，即可计算出小鼠血清中总补体的活性单位。

方法与结果

1 色谱条件选择

 色谱柱：HYPERSIL ODS(10肛m，200 mm× 4．6 mm，)，流动相：乙腈一甲醇一水一磷酸 (体积比为18．40：27．50：54．10：0．05)，流速： 0．8 mL·min～，检测波长：207 nm，柱温：20℃ ， 进样量：20 L。

2 标准溶液及内标溶液的配制

 精密称取人参皂苷Re适量，用无水甲醇溶 解配制成1 mg·I -1的标准储备液，稀释标准储备 液得100 mg·L 标准工作液。内标物*用无水甲醇溶解配成100 mg·L-1内标储备液，稀释 内标储备液得20 mg·L-1的内标工作液，置冰箱 中冷冻保存。

 3 给药方法

 对大鼠实施颈静脉持久性插管术[ 】，术后大 鼠单笼饲养，72 h后供实验使用，在每次取血的 间隔内将导管内充满100 mg·L-1肝素生理盐水 以防血凝。大鼠实验前禁食12 h交叉静注20、 30、40 mg·kg-1不同剂量的人参皂苷Re注射液， 交叉实验的实验间隔为72 h。于给药前和给药后 5、10、20、30、45、60、90、120 min各取血250 L置 于涂有肝素的塑料离心管中，离心(3 000 r·min-1) 5 rain，取血浆100肚L，置于冰柜(一18℃)中保存待测。

4 血浆样品的处理

 精密吸取血浆样品100 L置5．0 mL具塞 离心试管中，加入2 mI 正丁醇和20 L内标工 作液，置液体快速混合器上振荡5 min。离心 (5 000 r·min-1)10 min，移取上清液，氮气吹干， 用流动相溶解。离心(10 000 r·min-1)10 min，取 上清液进样20肚L。

5 专属性考察

 按“2．4”条方法操作。实验条件下，血浆中杂 质不干扰样品及内标物的测定，人参皂苷Re及 内标物*的保留时间分别为15 min和 17 min，。

值得注意的是，为了保证实验结果的准确性和可靠性，整个操作过程需要严格遵守试剂盒的使用说明，并控制好实验条件，如温度、时间等。此外，对于不同批次的小鼠血清样本，还需要进行平行对照实验，以消除实验误差对结果的影响。

小鼠血清总补体(CH50)Elisa测定试剂盒的应用范围广泛，不仅可用于小鼠免疫学研究，还可用于疾病诊断、预后判断以及疫苗效果评估等领域。随着生物医学研究的不断深入和发展，该试剂盒将在未来发挥更加重要的作用，为科研人员提供更加准确、快速和便捷的实验手段，推动生物医学研究的进步和发展。