团头鲂尾鳍细胞形态细胞培养步骤

团头鲂尾鳍细胞形态细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

原人参三醇(PPT) 20(S)-Protopanaxtriol(PPT) 34080-08-5
原薯蓣皂苷 Protodioscin 55056-80-9
原伪金丝桃素 Protopseudohypericin 54328-09-5
远志酸 Polygalacic acid 22338-71-2
远志皂苷元 Senegenin 2469-34-3
芸香柚皮苷 Narirutin 14259-46-2
8-O-乙酰山栀苷甲酯 8-O-acetylshanzhiside methyl ester 57420-46-9
银杏酸（13：1） Ginkgolic Acid (C13:1) 20261-38-5
银杏酸（15：1） Ginkgolic acid (C15:1) 22910-60-7
银杏酸（17：1） Ginkgolic acid (C17:1) 111047-30-4
异连翘酯苷A Isoforsythiaside 1357910-26-9
洋川芎内酯H Senkyunolide H 94596-27-7
异黄芪皂苷Ⅰ Isoastragaloside I 84676-88-0
异黄芪皂苷Ⅱ Isoastragaloside Ⅱ 86764-11-6
烟酸 Nicotinic acid 59-67-6
硬脂酸 Stearic acid 1957/11/4
乙酰黄芪皂苷Ⅰ AcetytastragalosideⅠ 84687-47-8
盐酸益母草碱 Leonurine hydrochloride 24697-74-3
乙氧基白屈菜红碱 5-Ethoxychelerthrine 79559-55-0
药根碱 Jatrorrhizine 3621-38-3
小檗碱 Berberine 633-65-8
香草酸 Vanillic acid 121-34-6
香叶木苷 Diosimin 520-27-4