大鼠直肠组织提取物操作流程

大鼠直肠组织提取物操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 

1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线。

羊抗人IgA (抗血清) Anti-Human IgA antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗人IgA (抗血清) Anti-Human IgA antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
兔抗人IgG～Fc (抗血清) Anti-Human IgG (Fc spec.) produced in ... 1ML 免疫血清
羊抗人IgG (抗血清) Anti-Human IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗人IgG (抗血清) Anti-Human IgG antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
羊抗人IgM血清 (μ链特异) Anti-Human IgM (μ-chain spec.) produc... 1ML 免疫血清
羊抗人IgM (抗血清) Anti-Human IgM antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗人IgM (抗血清) Anti-Human IgM antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
羊抗人血清 (多价抗体) Anti-Human Serum antibody produced in ... 1ML 免疫血清
兔抗人血清 (多价抗体) Anti-Human Serum antibody produced in ... 1ML 免疫血清
兔抗猴IgG (抗血清) Anti-Monkey IgG antibody produced in r... 1ML 免疫血清
兔抗小鼠IgG～Fc (抗血清) Anti-Mouse IgG (Fc spec.) produced in ... 1ML 免疫血清
羊抗小鼠IgG (抗血清) Anti-Mouse IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗小鼠IgG (抗血清) Anti-Mouse IgG antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
兔抗小鼠血清 (多价抗体) Anti-Mouse Serum antibody produced in ... 1ML 免疫血清
兔抗HRP (抗血清) Anti-Peroxidase antibody produced in r... 1ML 免疫血清
羊抗猪IgG (抗血清) Anti-Pig IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清
羊抗兔IgG (抗血清) Anti-Rabbit IgG antibody produced in g... 1ML 免疫血清
羊抗大鼠IgG (抗血清) Anti-Rat IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗大鼠IgG (抗血清) Anti-Rat IgG antibody produced in rabbit 1ML 免疫血清
兔抗绵羊IgG (抗血清) Anti-Sheep IgG antibody produced in ra... 1ML 免疫血清
图标 FITC荧光标记抗体；免疫组化/免疫荧光/流式荧光：1:20；抗体含量：10mg/ml；-20 ℃ 保存
中文名(CN) 英文名(EN) 规格(SP) 类别(Key)