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放免的原理具体是什么,检测灵敏度是多少?

2019-6-26

透明质酸A使用什么检测方法更精确

透明质酸A在大多数情况下都是选择用放射免疫的方法来检测,包括临床上也经常选择使用放免的方法来测透明质酸A,那么放免的原理具体是什么,检测灵敏度是多少?


透明质酸(Hyaluronic Acid, HA)是一种广泛存在于细胞外基质中的高分子多糖,主要由肝内皮细胞进行降解。肝组织正常结构受到损伤时,一方面 HA 的合成增加,另一方面肝脏对 HA 的降解能力下降,导致血清中 HA 水平明显增高,并且增高的程度与肝组织炎症及纤维化程度呈正相关。


急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化以及肝癌都导致血清 HA 水平增高,某些恶性肿瘤、肺心病患者的血清 HA 水平也会增高。慢性肝炎在用干扰素或激素进行治疗时,伴有血清 HA 水平下调。胚胎儿血清 HA 极高,新生儿血清 HA 仍维持在较高水平,随着年龄增长血清 HA 逐渐降低,到中、老年又略有升高。


血清 HA 水平是反映肝纤维化的重要指标,也可用于抗纤维化药物治疗时的动态观察。




本方法采用竞争放射免疫分析法,即标准或待测样品中的 HA 和125I-HA 共同与限量的透明质酸结合蛋白(Hyaluronic Acid BindingProtein, HABP)在适宜的条件下进行竞争性结合反应。一部分 125I-HA125与 HABP 结合形成复合物,而另一部分呈游离状态。 I-HA 与 HABP


结合的比例取决于标准或待测样品中非标记 HA 的含量,非标记 HA的含量越高,125I-HA 与 HABP 形成的复合物越少。HA-HABP 复合物与 HABP 抗体和第二抗体形成交联的聚合物沉淀下来,测定沉淀物的放射性计数。经过适当的数据处理后可获得标准曲线,从标准曲线


上查出被测样品的 HA 含量(数据可由计算机自动处理)。


【适用仪器】


适用于各类γ-放射免疫分析仪。


【血样处理】


取静脉血分离血清,48 小时内测量可在 2~8℃密闭保存;超过 48


小时-20℃密闭冷冻保存,至少稳定 2 个月,但要避免反复冻融。


【本药盒的主要技术指标 】


1. 测定范围:25~800ng/ml;


2. 灵敏度:5.5ng/ml;


3. 精密度:批内变异 CV<10%;批间变异 CV<15%。


【注意事项】收到药盒后尽快存放在 2-8℃保存,使用前应平衡至室


温,加试剂前必须摇匀。


1. 操作前请仔细阅读说明书,不同批号的试剂不得混用。


2. 加样操作应快速准确手法一致,尽量缩短整个加样时间。一


批测定中管数不宜过多,以加入 HABP 前后管相差在 5 分钟


内为宜,严格控制每步反应的时间和温度。


3. 加样头不可混用,以免交叉污染。


4. 加标准品、质控或样品时注意将样本加到试管底部;加标记


物时加样头不要碰到液面;加抗体时加样头应在液面之上约


1cm 以免交叉污染。


5. 温浴之前应充分混合均匀

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