乙型肝炎病毒 cccDNA PCR 测定试剂盒

产品及特点:

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乙肝病毒共价闭合环状 DNA（covalently closed circularDNA，cccDNA）
是乙肝病毒前基因组 RNA 复制的原始模板，虽含量较少，每个肝细胞内只有约
5～50 个拷贝，但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义，
只有清除了 cccDNA，才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态。因此 cccDNA 的
检测具有重要的临床意义，本产品即是乙肝病毒 cccDNA 快速检测试剂盒。它
具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物经过优化，特异性高。
3. 预期的 PCR 产物长度为 367 bp。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
5. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

运输及保存:

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 低温运输，-20℃保存，保存期限一年。

使用方法:

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一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 HBV cccDNA。
二、设置 PCR 反应（25 uL 体系）
1. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 样品 阳性对照 阴性对照
cccDNA 专一性引物一 2 uL 2 uL 2 uL
样品 DNA 1-5 uL 无 无
cccDNA 阳性对照 无 2 uL 无
补超纯水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
2. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行 PCR。
过程 温度 时间 
预变性 95℃ 10 min
PCR 反应
（30 个循环）
95℃ 10 s
55℃ 20 s
72℃ 20 s
延伸 72℃ 5 min
3. 电泳检测 PCR 产物。预期的 PCR 产物长度为 367 bp。