猪痢疾短螺旋体 PCR 检测试剂盒

产品及特点:

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猪痢疾（SD）的病原体是一种革兰氏阴性的厌氧性螺旋体，先后命名为猪痢
疾密螺旋体、猪痢疾蛇形螺旋体，现在统一命名为猪痢疾短螺旋体（Brachyspira
hyodysenteriae；B．h）。由猪痢疾短螺旋体引起的猪痢疾是一种肠道传染病，
以黏液性或黏液出血性腹泻为特征，也被称之为弧菌性痢疾、血痢、黑痢等。该病
在猪群中的发病率相当高，病猪生长发育受阻，耗料增加，给各地养猪业造成很大
的经济损失。本产品从动物检疫的实际出发，建立了 PCR 检测方法，用于猪痢疾
短螺旋体的快速检测。它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 根据猪痢疾短螺旋体 Nox 基因设计引物，引物经过优化，特异性强。预期的
PCR 产物长度为 149 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。

运输及保存:

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 低温运输，-20℃保存，保存期限一年。

使用方法:

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一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取猪痢疾短螺旋体 DNA。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体菌做阳性对照，
只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。
最好在专门的区域操作。
三、设置 PCR 反应（25 uL 体系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 样品 阳性对照 阴性对照
B．h 专一性引物一 2 uL 2 uL 2 uL
样品 DNA 1-5 uL 无 无
B．h 阳性对照 无 2 uL 无
补超纯水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行 PCR。
过程 温度 时间
预变性 94℃ 5 min
PCR 反应
（30 个循环）
94℃ 40 s
55℃ 30 s
72℃ 30 s
延伸 72℃ 1 min
5. 电泳检测 PCR 产物。预期的 PCR 产物长度为 149 bp。