大鼠试剂盒 11脱氢血栓素B2 elisa Kit检测过程中的注意事项
2023-11-20
大鼠试剂盒 11脱氢血栓素B2 elisa Kit检测过程中的注意事项:
液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。底物是光敏感的,要在临用前现配。检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。待检样品要澄清,否则会影响结果。温浴时间应遵守试剂盒规定。应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
ELISA试剂盒中手动洗板操作指南:
当洗涤缓冲液有结晶析出时,可将试剂瓶置于50°C水浴或培养箱中,使结晶物充分溶解再配制。加洗液要快速,没有多道移液器可以使用洗瓶。洗液应新鲜配制,以免被其他试剂污染,或染菌。洗板通常3~4次,加好洗液后轻轻摇动微孔板。甩板倒液要迅速干脆。倒液后在吸水纸上拍干,选用无粉尘和碎屑的吸水纸。需要用力拍板,使孔内没有可见液体挂壁。不能让样品干太久。
酶标板拍干后立即做后续的加液。拍板用的吸水纸可选择厨房用纸,吸水性好且无碎屑。为保证微孔洗液浸泡时间一致,可采用从前至后和从后至前的顺序交替加洗液的方法。通过预实验可以熟悉整个实验的流程,发现可能忽略的问题;可以测试样本和试剂盒是否匹配,一旦出现不匹配的情况,不至于浪费过多样本;可以对样品中目的分析物的浓度作一下大致参考,以确定合适稀释度。