2022-3-10
中文名:透明质酸酶
外文名:Hyaluronidase
中文别名:羊睾丸等
所属学科:生物学
常用:量60U~160U溶于生理盐水
作 用:暂时能降低人体内细胞间质的粘性
透明质酸酶纯化方案:透明质酸酶也叫玻璃suan酶。其可以降低组织黏度,提高毛细血管和组织的通透性,加速细胞内外物质的扩散,是一种重要的药物扩散剂。牛羊睾丸中提取的透明质酸酶与顶体酶混合存在。目前国内提纯该酶主要是传统的盐析方法,提纯纯度不高。生物分离介质作为纯化技术的新技术和新趋势,不仅生物相容性好,而且提纯精度高,可以达到较好的分离效果。牛羊睾丸中的透明质酸Chemicalbook酶分子量是6.1×104,为酸性蛋白酶,pI<7.0。最适pH值4.0~7.5。顶体蛋白酶是中xin蛋白酶,pI=7.0。可以用DEAEBio-sepFF弱阴离子交换介质进行纯化。在pH=7.0时透明质酸酶带负电荷,顶体蛋白酶不带电荷。顶体蛋白酶不带电荷,不被介质吸附,在上样过程中流穿出来。透明质酸酶带负电荷被介质吸附,再用高盐浓度的缓冲液洗脱下来,从而达到两个酶分离纯化的目的。
化学性质:白色或浅黄色絮状冻干物,无臭,易溶于水,不溶于乙醇、丙酮和yi醚,最适pH值4.5-6.0。稳定性:冻干物于4℃保存一年活力无明显下降;42℃条件下,加热60min活力不变;100℃加热5min保留80%活力;低浓度水溶液易失活,加入NaCl可增加其稳定性;遇热易变质。抑制剂有重金属离子(Cu2+、HR<2+、Fe<3+、Mn<2+、Zn<2+)、酸性有机染料、胆盐、多聚阴离子和高分子量的多聚糖如硫suan软骨素B、肝素、硫酸乙酰肝素;激活剂为多聚阳离子。1%水溶液在280nm处吸收系数为8。透明质酸酶主要是水解透明质酸中的N-乙酰-β-D-葡糖胺和D-葡糖醛酸之间的β-1,4-键,产生四糖残基,不释放单糖,酶反应:透明质酸+H2O═寡聚糖。
用途:用于生化研究,临床上常用于促进手术及创伤后局部水肿或血肿的消散,促进局ma药的浸润,减轻注射部位的疼痛,加速皮下、肌肉注射药液的吸收,也可用于肠粘连。
生产方法:以羊睾丸为原料,将乙酸提取液用硫酸铵初步沉淀,经透析后再次用硫酸铵、乙醇分级沉淀,精制后得产品。
DNAMarkerⅠ,Wide 10次/30次 Gibco分装
(DNA低分子量标准)
DNAMarkerⅢ,High 10ug Gibco分装
(DNA高分子量标准)
DNAseⅠ,Bovine 25mg/100mg Sigma分装
(脱氧核糖核酸酶)
dNTPMixture,50X 4x 4uM/4x 10uM Amresco分装
(dNTP混合物)
D-Raffinose 10g/50g/100g/500g 原装 Amresco J392
(D-绵子糖)
D-Ribose 10g/25g/50g/100g Amresco 0671
(D-核糖)
Driselase 100mg/500mg/1g/5g Sigma D9515
(崩溃酶)
D-Sorbicacid 100g/1kg 国产
(D-山梨酸)
D-Sorbitol 500g /1kg /5kg原装 Amresco 0691
(D-山梨醇)
DTE 1g/5g/25g原装 Amresco 0425
(1,4-Dithioerythritol)
(二硫赤鲜醇)
D-Trehalose 5g/10g/250g原装 Sigma T5251
(D-海藻糖)
DTT 1g/2g/5g Amresco分装
(二硫代苏糖醇)
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