团头鲂尾鳍细胞；WCF复苏操作要点

团头鲂尾鳍细胞；WCF复苏操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

BxPC-3, 人原位胰腺腺癌细胞株
U-2 OS, 人骨肉瘤细胞
WM451, 人黑色素瘤细胞
SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌细胞
C6, 大鼠脑胶质瘤细胞
UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌
Hela, 人宫颈癌细胞系
HNE2, 人鼻咽癌细胞系
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌细胞系
786-O [786-0], 人肾透明腺癌细胞
HEC-1A, 人子宫内膜癌细胞系
Caki-1, 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞
Ishikawa, 人子宫内膜癌细胞系
ACHN, 人肾细胞腺癌细胞
JEC, 人子宫内膜腺癌细胞系
BPH-1, 人前列腺增生细胞
RL95-2, 人子宫内膜腺癌细胞系
Ca Ski, 人宫颈癌细胞
MCF-7 [MCF7], 人乳腺癌细胞系
Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
GBC-SD, 人胆囊癌细胞
5637, 人膀胱癌细胞
CNE1, 人鼻咽癌细胞系
HT-29, 人结肠癌细胞