犬副流感病毒PCR检测试剂盒操作反应五要素

犬副流感病毒PCR检测试剂盒操作反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa试剂盒
人转化生长因子β1(TGF-β1)elisa试剂盒
人转化生长因子α(TGF-α)elisa试剂盒
人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa试剂盒 
人干细胞因子受体(SCFR)elisa试剂盒
人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)elisa试剂盒
人可溶性CD40配体(sCD40L)elisa试剂盒 
人可溶性CD30配体(sCD30L)elisa试剂盒 
人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa试剂盒 
人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)elisa试剂盒
人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)elisa试剂盒
人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)elisa试剂盒
人神经营养因子4(NT-4)elisa试剂盒
人神经营养因子3(NT-3)elisa试剂盒
人的神经生长因子(NGF)elisa试剂盒 
人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa试剂盒
人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)elisa试剂盒
人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa试剂盒 
人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa试剂盒
人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)elisa试剂盒
人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)elisa试剂盒
人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)elisa试剂盒
人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa试剂盒
人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)elisa试剂盒
人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa试剂盒
人L选择素(L-Selectin/CD62L)elisa试剂盒
人白介素9(IL-9)elisa试剂盒