2020-4-22
全球平均有约15~35%细胞实验室发生支原体污染(65~80%严重污染),超过一半实验室有两种支原体污染;而全球各地的细胞库中,也有发现5~35%不等的支原体感染率,日本甚至高达60%。
但!全球目前有在做常规支原体监控的细胞实验室却不到50%!
为什么可以搞到全球这么多细胞库污染?
支原体体积非常小, 极易通过0.22um滤膜, 且一般光学显微镜无法观察到。
支原体能附着并存活在器物表面(操作台, 培养箱,显微镜等), 提高操作污染概率。
支原体生长缓慢,通常不破坏宿主细胞但默默改变了细胞生长代谢,且对传统抗生素具抗性,因为抗生素大多破坏细菌细胞壁, 而支原体恰恰没有细胞壁。
支原体污染初期, 培养基不变色, 细胞形态正常,但等大量污染时, 为时已晚, 耗时又耗力。
你说,支原体烦不烦!
目前检测方法可大致分成四种:
■微生物培养法
将样品培养在特殊琼脂培养基上,在37?C有氧环境中孵育2周,阳性培养基上会长出100~400um大小的“煎蛋状”菌落。
■DNA萤光染色法
支原体DNA中A-T含量占多数(55~80%),容易被Hoechst 33258此荧光剂染上,被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之萤光小点。
上海研生实业有限公司 版权所有