UT-7 人急性成巨核细胞白血病细胞
2017-5-9
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细胞名称 |
培养条件： |
传代方法 |
货号 |
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UT-7 人急性成巨核细胞白血病细胞 |
DMEM+10% FBS +1%双抗 |
维持细胞浓度在1.0~1.5×106 cells/ml，1：2传代，2~3天1次。 |
C1171 |
详细介绍：
细胞名称 人类原巨核细胞型白血病细胞；UT-7
形态特性 圆形
生长特性 悬浮生长，有1%~2%的细胞可轻微贴壁。
特征特性 该细胞于1988年建系；源于一名64岁患有急性粒细胞白血病（AML M7）的男性的骨髓；对多种细胞因子有反应。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；5-7u/ml Epo
传代方法 维持细胞浓度在1.0~1.5×106 cells/ml，1：2传代，2~3天1次。
传代情况 C7
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
相关资料：
支原体检测 培养法（-）
STR
Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：10，12；D18S51：14，17；D19S433：14，14.2；D21S11：31.2；D2S1338：18，23；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：8；D8S1179：11，15；FGA：23；TH01：6，9；TPOX：10；vWA：14，18，19；
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞服务内容:
1、协助引进科研急需 的细胞株/系。
2、提供细胞保藏服务。
3、提供细胞供应服务。
4、提供细胞筛选或建立特殊细胞株/系的服务。
5、 提供与细胞培养配套的部分试剂
6、 提供支原体等各项检测的技术服务
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备培养基；北美胎牛血清，10%；双抗1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
1. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
2. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
3. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。 下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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